(1)實驗原理：

  ①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

  ②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

  (2)實驗過程：

  土壤取樣：采集土樣時，應選擇富含纖維素的環(huán)境

  ↓

  梯度稀釋：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度

  ↓

  梯度稀釋

  ↓

  涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上

  挑選產生中心透明圈的菌落：產生纖維素酶的菌落周圍出現透明圈,考試技巧，從產生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在30～37℃條件下培養(yǎng)，可獲得較純的菌種。

  剛果紅染色的兩種方法的比較：

  先培養(yǎng)微生物，在加入剛果紅在到平板時加入剛果紅

  優(yōu)點顯示出的眼神反映基本上是纖維素分解菌的作用操作簡便，不存在菌落混雜問題

  缺點操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜(1)由于瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質，可以使能夠產生淀粉酶的微生物出現假陽性反應

  (2)有些微生物具有降解色素的能力，長時間培養(yǎng)會降解剛果紅，從而形成明顯的透明圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分

  知識拓展：1.纖維素與纖維素酶

  (1)纖維素

  ①化學本質：一種多糖。

  ②分布：棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。

  (2)纖維素酶

  ①習慣上，將纖維素酶分成三類：C1酶、Cx酶和β葡糖苷酶。C1酶是對纖維素最初起作用的酶，破壞纖維素鏈的結晶結構。Cx酶是作用于經C1酶活化的纖維素、分解β-1，4-糖苷鍵的纖維素酶。β葡糖苷酶可以將纖維二糖、纖維三糖及其他低分子纖維糊精分解為葡萄糖。

  ②作用：纖維素

  纖維二糖葡萄糖

  2、為確定得到的微生物是纖維素分解菌，還需進行發(fā)酵產纖維素酶的實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖繼素后所產生的葡萄糖進行定量測定。

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